作者Evil Genius国庆假期马上结束了大家做好搬砖的准备了么今日我们分享文献Graphical AbstractInfiltration of γδ T cells in SCLCγδ T细胞在SCLC中的浸润非受累淋巴结Non-affected lymph nodeγδ T细胞低细胞毒性潜力SCLC受累淋巴结SCLC-affected lymph nodeγδ T细胞高细胞毒性潜力浸润免疫细胞Redirected- and sensitised-killing of Vδ2⁺ γδ T cellsVδ2⁺ γδ T细胞的重定向和敏化杀伤TarlatamabDLL3-CD3 BiTE通过CD3和TCR重定向Vδ2⁺细胞BTN2A1/BTN3A1与Vδ2⁺ TCR结合Zoledronate敏化SCLC细胞Better outcomes associated with γδ T cells ICBγδ T细胞与ICB相关的更好结局n382 SCLC患者γδ T高 αPD-L1组总生存概率优于γδ T低 αPD-L1组Autologous and allogenic co-culture with Vδ2⁺ γδ T cells与Vδ2⁺ γδ T细胞的自体和异体共培养SCLC受累淋巴结、PBMC、离体SCLC扩增、离体Vδ2⁺扩增共培养验证杀伤效果简介γδ T细胞浸润SCLC并具有抗癌能力。这些细胞可以通过多种治疗手段被利用来杀伤SCLC包括通过BTN2A1的MHC非依赖性识别机制。值得注意的是γδ T细胞浸润在SCLC中具有临床相关性高浸润预测αPD-L1治疗后的改善结局。亮点γδ T细胞浸润预测αPD-L1治疗后SCLC患者更好的结局γδ T细胞在tarlatamabDLL3-CD3 BiTE重定向的SCLC杀伤中有效Zoledronate敏化SCLC细胞对Vδ2⁺细胞介导的杀伤BTN2A1是Vδ2⁺细胞识别和杀伤SCLC所必需的独立于MHC-I摘要背景小细胞肺癌SCLC是一种高度侵袭性肿瘤对抗PD-(L)1阻断的敏感性有限这可能是由于MHC-I的表观遗传沉默所致。因此阐明MHC-I非依赖性的免疫识别机制对于增强治疗反应和改善更多患者的临床结局至关重要。方法利用单细胞方法研究发现了SCLC患者生物标本中的γδ T细胞浸润。主要发现尽管表达PD-1γδ T细胞仍维持细胞毒性转录谱表明其具有抗肿瘤作用两项改变临床实践的临床试验中高γδ T细胞浸润预测SCLC患者对anti-PD-L1免疫治疗的改善反应使用临床前模型证明γδ T细胞在tarlatamabDLL3-CD3 BiTE重定向的SCLC杀伤中有效ZoledronateFDA批准化合物可敏化SCLC细胞对γδ T细胞介导的杀伤结论研究结果表明被激活的γδ T细胞是SCLC治疗的潜在有价值靶点。引言SCLC的临床挑战SCLC是肺癌的侵袭性亚型大多数患者表现为广泛期ES疾病诊断和分期通常通过支气管内超声引导下经支气管针吸EBUS-TBNA取样病理胸部淋巴结LNs全身治疗铂类化疗联合抗PD-L1atezolizumab、durvalumab免疫治疗是ES疾病一线标准治疗尽管如此SCLC患者对免疫治疗的持久反应比例仍然很低可能原因对驱动免疫逃逸的关键机制理解不完全几个因素SCLC中MHC-I的表观遗传沉默CD8⁺ T细胞浸润的可变性SCLC肿瘤细胞表面PD-L1表达的缺失这表明适应性免疫系统特别是CD8⁺ T细胞在根除SCLC肿瘤细胞方面存在缺陷BiTEs作为替代策略双特异性T细胞衔接器BiTEs正在迅速成为有效的免疫治疗特异性方法以MHC-I非依赖的方式促进细胞毒性T细胞重定向到肿瘤Tarlatamab靶向SCLC肿瘤细胞表面的DLL3和T细胞上的CD32024年5月获得FDA加速批准基于在预治疗ES-SCLC患者中显著的客观反应和总生存率在临床前SCLC模型中观察到常规CD8⁺和CD4⁺ T细胞激活和增强的肿瘤浸润但γδ T细胞群体在tarlatamab抗肿瘤活性中的贡献仍未被探索γδ T细胞的特征先天样T细胞群体与常规αβ T细胞不同可以独立于MHC分子上的抗原呈递进行免疫监视使用T细胞受体TCRs或自然杀伤NK细胞受体识别转化细胞上的应激诱导配体越来越被探索用于癌症免疫治疗被认为是抗肿瘤免疫的特别有吸引力的靶点因为定位于上皮屏障部位如肺部对功能性耗竭的易感性降低γδ T细胞已被认为是与免疫检查点阻断ICB协同作用的效应群体特别是在MHC-I表达功能障碍的上皮癌中γδ T细胞的存在和频率与非小细胞肺癌NSCLC和25种实体癌的预后相关研究目的使用scRNA-seq和免疫表型分析全面分析SCLC患者生物标本中的免疫细胞景观扰动通过检查癌症受累和非受累样本鉴定出具有有效抗肿瘤免疫特征的肿瘤内γδ T细胞群体使用临床前模型验证支持利用γδ T细胞的 emerging therapies 在SCLC治疗中的临床效用结果一、SCLC活检样本中的γδ T细胞显示细胞毒性特征方法对SCLC患者肿瘤生物标本进行scRNA-seqn11 EBUS-TBNA生物标本n1组织切除酶解消化样本通过流式细胞术富集免疫CD45和肿瘤EpCAM细胞单细胞分选到384孔板使用CEL-Seq2进行scRNA-seq分析某些患者通过排除成纤维细胞和基质细胞CD31-CD140b-CD235a富集免疫和肿瘤细胞总计13,002个单细胞通过质量控制每个患者贡献498至1,537个细胞整合和批次校正后UMAP可视化显示免疫和肿瘤细胞之间的清晰分离免疫细胞聚类免疫细胞分离、批次校正和重新聚类产生20个cluster使用已发表的健康个体和SCLC患者scRNA-seq基因签名注释免疫细胞鉴定出关键细胞毒性亚群γδ T细胞clusters 6和7、CD8 T细胞cluster 10、NK细胞cluster 9由于γδ T细胞显示与CD8 T和NK细胞的转录相似性为验证clusters 6和7为真正的γδ T细胞对来自两名SCLC患者SCLC13和SCLC14的非受累LNN-LN和SCLC受累LNS-LN活检的FACS分选Vδ2和Vδ2- γδ T细胞进行scRNA-seqn450细胞使用已发表的γδ T细胞签名确认clusters 6和7表达更高水平的γδ T细胞相关基因基因集测试显示clusters 6和7中γδ T细胞评分统计学显著富集尽管S-LN和原发肺肿瘤之间存在一些解剖部位依赖的免疫细胞组成偏差特别是在B细胞 compartmentγδ T细胞在两个解剖部位均被观察到并在所有12例患者样本中可见免疫组化IHC染色确认所有患者匹配的诊断 blocks 中存在γδ T细胞细胞毒性转录程序比较注释免疫细胞亚群中 canonical 细胞毒性基因的表达γδ T细胞群显示高水平的细胞毒性介质转录本在其他SCLC scRNA-seq数据集中也可见从S-LN样本分离的γδ T细胞显示比N-LN标本更高的细胞毒性基因表达这些发现提供了SCLC中浸润性γδ T细胞显示细胞毒性特征的首次报告结果二、高γδ T细胞频率预测SCLC患者对anti-PD-L1免疫治疗的OS获益scRNA-seq队列分析将γδ T细胞频率与临床结局相关联观察到患者活检样本中γδ T细胞频率与更长OS之间的显著相关性相比之下NK细胞和CD8 T细胞频率与生存之间未见趋势患者SCLC01显示最高频率的γδ T细胞63%并表现出长期生存80个月该患者在接受atezolizumab联合化疗前采集的重复组织活检T4显示肿瘤边缘γδ T细胞频率更高表明这些细胞在肿瘤控制中的潜在作用MHC-I表达分析相对于另一个原发肿瘤SCLC样本SCLC02患者SCLC01的原发肿瘤活检显示HLA-A、-B、-C的低细胞表面表达显示HLA-A、HLA-B、HLA-C和B2M的最低转录表达在S-LN样本的肿瘤细胞中比较表达水平时也观察到类似趋势患者SCLC01诊断时T0和治疗期间T1和T2的系列外周血样本显示高γδ T细胞频率T060%T157%T247%显著超过其他SCLC患者n170.2%-30%和健康供体5%这表明患者SCLC01中循环和原发肿瘤部位的高频率γδ T细胞可能有助于观察到的延长生存IMpower133临床试验分析分析n271 ES-SCLC患者的bulk transcriptome数据Atezolizumabanti-PD-L1联合铂类化疗卡铂/依托泊苷EP显示改善OS和PFS使用δ TCR链TRDC的mRNA表达作为γδ T细胞浸润的代理TRDChigh患者在atezolizumab EP后趋向更长OS15.4个月 compared with 同一治疗组TRDClow患者10.8个月类似地atezolizumab EP治疗的TRGC2high编码γ TCR链患者趋向改善OS14.4个月HR0.8295% CI0.50-1.3 compared with 同一治疗组TRGC2low肿瘤10.8个月CASPIAN 3期临床试验验证ES-SCLC患者TRGC2high在durvalumabanti-PD-L1 EP后趋向更长OS12.7个月HR0.7395% CI0.42-1.3 compared with 同一治疗组TRGC2low患者8.6个月值得注意的是在未接受ICB的局限期SCLC患者中TRDChigh表达与有利OS之间无显著关联表明TRDC表达单独不太可能作为SCLC的一般预后生物标志物SCLC分子亚型分析先前对IMpower133试验患者的SCLC转录组分析表明inflamed分子亚型SCLC-I肿瘤以T细胞富集基因签名为特征似乎更可能从免疫治疗中获益研究能够在队列中解析许多非SCLC-I分子亚型的γδ T频率SCLC-I签名缺乏γδ T细胞相关基因如TRDC和TRGC2由于CD8在蛋白质和转录水平上的共享表达从γδ T细胞中解卷积CD8 T细胞具有内在挑战性实际上在IMpower133和CASPIAN数据集中51.5%和70.9%的CD8Ahigh肿瘤也被分类为TRDChigh和TRGC2high因此不能排除γδ T细胞对基于CD8Ahigh转录表达分层患者时观察到的改善生存率的影响值得注意的是HLA-A、HLA-B、HLA-C和B2M表达在TRDChigh; CD8Alow肿瘤中显著更低结果三、SCLC活检中γδ T细胞的表征流式细胞术分析评估N-LN和S-LN采样部位以及健康成人供体的免疫细胞计数与组织驻留和激活/耗竭标志物配对点图显示N-LN和S-LN中γδ T、αβ CD8 T和αβ CD4 T细胞占CD3 T细胞的百分比γδ T细胞在S-LN中显著增加*p0.05CD8 T细胞在S-LN中显著增加*p0.05CD4 T细胞在S-LN中显著增加*p0.05CD103表达代表性流式细胞术图显示患者SCLC13中N-LN蓝色和S-LN红色采样部位Vδ2、Vδ2-和αβ CD8 T细胞上的CD103表达CD103细胞占总Vδ2、Vδ2-和αβ CD8 T细胞的百分比的量化Vδ2-和CD8 T细胞在S-LN中CD103显著增加**p0.01Vδ2细胞无显著差异nsPD-1表达代表性流式细胞术图显示患者SCLC13中N-LN蓝色和S-LN红色采样部位Vδ2、Vδ2-和αβ CD8 T细胞上的PD1表达PD1细胞占总Vδ2、Vδ2-和CD8 T细胞的百分比的量化Vδ2细胞在S-LN中PD1显著增加*p0.05CD8 T细胞在S-LN中PD1显著增加**p0.01Vδ2-细胞无显著差异ns结果4、Vδ2细胞在tarlatamab介导的SCLC细胞杀伤中与CD8 T细胞一样有效实验工作流程使用扩增的Vδ2和αβ CD8 T细胞与人类SCLC细胞系共培养±tarlatamab通过活细胞成像Incucyte监测肿瘤细胞杀伤Tarlatamab作用机制靶向SCLC肿瘤细胞表面的DLL3和T细胞上的CD3DLL3表达SCLC细胞系DLL3表达热图SHP7724.2高H14624.2高DMS27318.2高H828.2中H5243.2低H5263.0低H2112.1低H4601.2低DLL3阴性NSCLC杀伤实验与DLL3high水平一致在tarlatamab存在下SHP77细胞与Vδ2细胞或CD8 T细胞共培养时观察到显著杀伤DLL3阴性H460细胞未见杀伤癌细胞死亡在加入tarlatamab后24小时量化因为这始终代表活细胞成像量化的最大死细胞面积在所有细胞系中1,000至100 pM tarlatamab之间未见剂量依赖性杀伤除了DMS273因此后续所有实验在生理相关剂量1,000 pM下量化癌细胞杀伤SCLC亚型杀伤Tarlatamab促进Vδ2细胞对多种SCLC亚型的癌细胞杀伤SCLC细胞系H211、H146和H82是例外其中观察到Vδ2细胞的自发杀伤独立于tarlatamabVδ2和CD8 T细胞之间的癌细胞杀伤程度相当并与DLL3表面表达相关值得注意的是SCLC-P H211细胞系对tarlatamab介导的杀伤表现出最高敏感性Vδ2和CD8 T细胞尽管DLL3表面表达低细胞因子产生Tarlatamab介导的反应导致促炎细胞因子产生IFN-γ、TNF、GM-CSF和IL-13分泌在Vδ2和CD8 T细胞之间相当组织相关表型Vδ2细胞具有显著更高比例的CD103和PD-1/CD103细胞 compared with CD8 T细胞表明Vδ2细胞中更高的组织相关表型增殖和细胞毒性Vδ2细胞经历多轮增殖在tarlatamab存在下与SCLC细胞共培养72小时后细胞内GZMB显著增加同时保持活力这些数据表明tarlatamab可以有效接合Vδ2细胞介导SCLC细胞杀伤从而突出其作为CD3靶向免疫治疗效应细胞的潜力结果5、Zoledronate促进自发性γδ T细胞介导的杀伤背景观察到一部分SCLC细胞的自发杀伤研究试图研究Vδ2细胞独立于tarlatamab靶向检测和杀伤SCLC的相互作用机制假设可能通过其TCR或NK细胞受体如NKG2D介导NKG2D分析在S-LN样本中Vδ2细胞显示升高的NKG2D表面表达然而NKG2D配体MICA/B在scRNA-seq队列的SCLC肿瘤细胞中低表达在显示Vδ2细胞自发杀伤的SCLC细胞系中缺失与此一致成功阻断NKG2D未能抑制Vδ2细胞杀伤SCLC细胞的能力表明在系统中杀伤独立于NKG2D接合发生BTN2A1/BTN3A1分析探索Vδ2细胞是否可以通过TCR与BTN2A1/BTN3A1异二聚体在开放构象下接合识别转化细胞由细胞内磷酸抗原pAg积累驱动观察到高BTN2A1而非BTN3A1与自发Vδ2杀伤之间的相关性表明偏向于TCR与BTN2A1接合甲羟戊酸途径是细胞内pAg的关键来源通过使用FDA批准的药物如simvastatin和zoledronate扰动甲羟戊酸途径中的关键酶HMGCR和FDPS来间接调节BTN2A1/BTN3A1构象Simvastatin实验Simvastatin抑制HMGCR从而阻止pAg积累测试simvastatin治疗是否会减弱自发杀伤H211、H82和H146 SCLC细胞的simvastatin治疗降低了它们对来自两个独立供体的Vδ2细胞自发杀伤的易感性Zoledronate实验用zoledronate抑制FDPS驱动pAg积累不仅增强了具有自发杀伤易感性的SCLC系H211、H82和H146的杀伤还敏化了先前难治的细胞系SHP77和DMS273与这些观察一致zoledronate增加了Vδ2细胞的激活通过CD103上调测量BTN2A1敲除验证使用CRISPR-RNP技术在Vδ2响应性SCLC细胞系中敲除BTN2A1SCLC细胞中BTN2A1敲除KO减弱了Vδ2细胞在无zoledronate和有zoledronate时的反应能力这些结果证明Vδ2细胞对SCLC细胞的反应性依赖于系统中的Vδ2 TCR-BTN2A1相互作用临床相关性假设高BTN2A1表达的SCLC患者可能从PD-L1/PD-1轴的去抑制中获得更大获益IMpower133数据集分析显示高BTN2A1表达与atezolizumab EP治疗后SCLC患者改善OS之间的显著关联14.4个月 compared with 其他组9.7-10.4个月HR0.6795% CI0.45-0.99在CASPIAN临床研究中验证高BTN2A1肿瘤的ES-SCLC患者在durvalumab EP后获得最大OS获益12.7个月结果表明高BTN2A1可能作为Vδ2细胞利用以在SCLC中引发抗肿瘤反应的治疗轴结果6、Zoledronate和tarlatamab在自体模型中促进γδ T细胞介导的SCLC杀伤患者来源模型利用现有协议从外周血单核细胞PBMCs同时扩增Vδ2细胞并从新鲜分离的诊断EBUS-TBNA LN样本生成肿瘤类器官SCLC肿瘤类器官生长为松散聚集体随时间形成漂浮球体保留SCLC的形态和表型特征自体Vδ2细胞从患者SCLC15 PBMCs中用zoledronate和IL-2扩增13天内Vδ2细胞增加约260倍0.15%-38.5%从另外两名SCLC患者扩增Vδ2细胞分别增加约86倍0.096%-8.35%至约58倍1.54%-88.8%自体共培养肿瘤类器官与来自同一患者SCLC15的Vδ2富集PBMCs体外暴露在zoledronate或tarlatamab存在下显示增强的肿瘤细胞杀伤 compared with 载体处理的对照类器官评估Vδ2富集PBMCs中哪些T细胞亚群介导这种抗肿瘤效应与肿瘤类器官共培养72小时后分析Vδ2和CD8 T细胞上的PD-1和CD103表达Tarlatamab治疗后Vδ25.25%增至9.09%和CD8 T细胞0.45%增至4.47%中PD-1CD103双阳性群体增加Zoledronate治疗后PD-1CD103双阳性群体的增加仅在Vδ2细胞中检测到10.9%增至21.6%异体验证在异体设置n2 SCLC患者中使用从两名健康供体外周血分离的Vδ2细胞验证这些发现进一步支持Vδ2细胞在SCLC中的关键抗肿瘤治疗潜力讨论SCLC治疗现状与挑战尽管是当前标准治疗SCLC患者对anti-PD-(L)1免疫治疗的持久反应仍然很低因此替代免疫治疗方法能够引发增强反应和预测生物标志物的发现将对患者具有变革性γδ T细胞是一个新兴的免疫治疗靶点因其在具有抗原呈递途径表观遗传改变的肿瘤中的抗癌效果而迅速获得关注主要发现提供γδ T细胞靶向SCLC肿瘤关联的见解揭示其在肿瘤微环境中独特的组织相关和效应表型通过利用FDA批准疗法在SCLC临床前和患者来源模型中的γδ T细胞强效抗癌活性提供证据表明γδ T细胞可能是SCLC患者中被低估但有前途的免疫治疗靶点SCLC-I分子亚型与γδ T细胞当前识别对ICB免疫治疗反应的SCLC患者的框架尽管是回顾性的依赖于T细胞和抗原呈递基因签名这些患者被认为是免疫inflamedSCLC-I虽然这些签名富集CD8 T细胞但它们显著排除了γδ T相关基因即TRDC和TRGC2使用两个临床数据集IMpower133和CASPIAN显示基于高γδ T相关基因分层的SCLC患者接受atezolizumab治疗后显示与SCLC-I患者相当的改善结局此外发现γδ T细胞也存在于其他SCLC分子亚型即SCLC-A、-N和-P中这些通常MHC-I低且非免疫性inflamed证明肿瘤微环境中的γδ T细胞显示组织相关特征并维持细胞毒性效应功能尽管表达PD-1 unlike αβ CD8 T细胞其中PD-1通常标记耗竭表明γδ T细胞可能在PD-(L)1阻断下保留效应功能特别是在MHC-I低肿瘤中与NSCLC、结肠癌和Merkel细胞癌中的先前证据一致发现表明γδ T细胞是SCLC中具有治疗相关性的被低估免疫群体γδ T细胞可能作为MHC-I低分子亚型中ICB反应性的预测生物标志物正在进行中的SWOG2409-PRISM临床试验NCT06769126旨在采取亚型-生物标志物导向的治疗方法强调了准确基因 curation 对识别SCLC-I亚型的重要性因此研究支持将γδ T细胞相关基因纳入以识别更广泛的可能从ICB免疫治疗中获益的SCLC患者队列Tarlatamab与γδ T细胞Tarlatamab因其将CD3 T细胞重定向到癌细胞独立于MHC-I接合的能力而革新了SCLC患者反应然而先前的报告缺乏关于tarlatamab是否有效重定向γδ T细胞的 granularity本研究表明Vδ2细胞最常见的循环γδ T细胞亚群在SCLC癌症杀伤中与αβ CD8 T细胞一样有效表明Vδ2细胞可能是tarlatamab治疗后的强效效应细胞此外显示有效重定向发生在 irrespective of SCLC分子亚型表明高DLL3表达先前显示仅限于SCLC-A和SCLC-N亚型不是tarlatamab反应的预测生物标志物循环Vδ2 γδ T细胞的临床效用支持靶向循环Vδ2 γδ T细胞的效用双特异性γδ T细胞衔接器如LAVA-051和LAVA-1207的临床试验已将较高的基线Vδ2频率与延长的治疗反应联系起来升高的Vδ2水平与非小细胞肺癌的良好预后相关虽然与长期生存SCLC患者相关的生物学特征 largely unknown但发现患者SCLC01具有令人印象深刻的OS诊断后≥6年循环和SCLC组织样本中异常高的γδ T细胞数量可能表明γδ T细胞在肿瘤控制中的关键作用因此需要更大的患者队列来确定循环Vδ2水平是否可作为预后生物标志物此外数据支持进一步研究γδ T细胞过继转移方法在SCLC中的临床效用Zoledronate与tarlatamab的互补策略Tarlatamab依赖双特异性靶向来接合CD3 T细胞数据表明zoledronate通过不同机制起作用既扩增又敏化Vδ2细胞对SCLC细胞 irrespective of 分子亚型这些互补策略突出了SCLC中γδ T细胞 based approaches 的未开发治疗潜力考虑到化疗耐药SCLC中甲羟戊酸途径的依赖性增加这与增加的pAg相关虽然zoledronate目前用于治疗骨质疏松症和溶骨性癌症但它与乳腺癌的无病生存改善、NSCLC骨转移患者的OS改善以及NSCLC和SCLC中骨骼相关事件的减少相关然而zoledronate对SCLC中OS的具体影响仍不清楚鉴于高达25%的SCLC患者诊断时出现骨转移发现强调需要研究其对SCLC患者结局的更广泛影响值得注意的是新兴的靶向递送策略包括DLL3导向的抗体-药物偶联物可能有助于克服zoledronate的骨趋向性和脱靶摄取为增强SCLC中γδ2介导的抗肿瘤活性提供有前途的途径结论研究强调γδ T细胞存在于SCLC肿瘤微环境中并准备发挥抗肿瘤活性可以通过现有免疫疗法以及重新利用FDA批准药物如zoledronate来增强特别是Vδ2细胞的独特特征可以规避与MHC-I低SCLC相关的挑战此外 concerted effort refining biomarkers to identify an immune-inflamed group and patients who may benefit from adoptive transfer strategies could ultimately improve OS for a broader range of SCLC patients in the future研究局限性研究主要分析癌症受累LN活检样本原发SCLC肿瘤代表性有限尽管如此鉴于γδ T细胞在肺部占据免疫 niche发现表明γδ T细胞可能也浸润原发肿瘤此外虽然研究仅从约3,500个免疫细胞生成单细胞转录谱但一致地在所有患者中鉴定出γδ T细胞群体突出了CELseq2方法的潜在技术优势此外虽然共培养 assay 是证明Vδ2细胞有效重定向到SCLC肿瘤和 interrogate 潜在机制的有力、还原论手段但未在人源化小鼠模型中体内验证这种抗癌活性不能排除Vδ2-细胞引发类似效应实际上在SCLC患者活检样本中也观察到Vδ2-细胞因此Vδ2以外的其他γδ T细胞亚型的抗肿瘤活性值得进一步研究方法Key Resources Table关键资源表抗体用于流式细胞术和IHC的多种抗体抗CD45、抗EpCAM、抗CD31、抗CD140b、抗CD235a、抗CD14、抗CD19、抗CD3、抗γδTCR、抗Vδ2、抗CD4、抗CD8、抗CD56、抗CD103、抗PD-1、抗NKG2D等细菌和病毒株Incucyte Nuclight Red Lentivirus生物样本癌症受累LN活检样本、非受累LN活检样本、原发肿瘤活检样本、PBMCs、健康供体Vδ2和CD8 T细胞化学品、肽和重组蛋白Tarlatamab、DAPI、Y-27632、重组人IL-2、Zoledronic acid、Simvastatin、MICA-Tetramer关键商业 assaySYTOX Green、Zombie NIR、Live/dead fixable NIR、Human TruStain FcX、Human Fc Block、Bambanker、P3 Primary Cell 4D Nucleofector X Kit Sdeposited datascRNA-seq of all immune cells from n12 SCLC patients、scRNA-seq of γδ T cells from n2 SCLC patients实验模型细胞系SHP77、H146、DMS273、H82、H524、H526、H211、H460、类器官SCLC15、SCLC16寡核苷酸sgRNABTN2A1null1、BTN2A1null2、Non-targeting control、NGS primers软件和算法GraphPad Prism 10、R Studio、cBioportal、BioRender、Incucyte Live Cell Analysis System、FlowJo、Affinity Designer 2、scPipe、Rsubread、R、Bioconductor、Seurat、scater、scran、harmony、batchelor、CRISPR indel calculator v2生活很好有你更好。