发现新靶点！CD48 助力破解肝癌免疫治疗耐药难题

肝细胞癌是全球主要的肿瘤致死性疾病临床治疗手段有限。免疫检查点阻断疗法虽为肝癌治疗带来突破但仅10%–30%患者可有效应答多数患者会出现获得性耐药疗效受限。肿瘤相关巨噬细胞是肝癌免疫微环境的核心组分占肿瘤浸润免疫细胞的50%左右其异质性及调控肿瘤进展、介导免疫耐药的机制尚不明确。目前肿瘤相关巨噬细胞研究多局限于传统M1/M2二元分类难以阐释其复杂的肿瘤调控机制。CD48是一种GPI锚定细胞膜蛋白现有研究多聚焦其在T细胞、NK细胞中的作用其在巨噬细胞及肝癌中的功能、信号调控机制尚未明确是当前肝癌免疫治疗领域亟待解决的难题。2025年12月第四军医大学团队在顶刊《Gut》发表相关研究围绕肝癌肿瘤相关巨噬细胞的新型免疫调控靶点展开深度探索。该研究通过临床样本多组学分析鉴定出CD48阳性肿瘤相关巨噬细胞这一新型促癌亚群。研究证实CD48可与MMP14形成细胞膜顺式复合物激活RAP1-YAP-STAT3信号通路上调免疫抑制基因表达进而推动肝癌进展与免疫治疗耐药。研究数据表明基因敲除或抗体阻断CD48可重塑巨噬细胞的抗肿瘤表型增强CD8T细胞的杀伤能力。同时靶向CD48与抗PD-1治疗具备显著协同抑癌效果。该研究证实CD48是肿瘤相关巨噬细胞上的全新免疫检查点为肝癌免疫耐药破解、新型靶向联合治疗方案研发提供了全新靶点与理论支撑。一、材料与方法一临床样本与单细胞测序收集18例初治HCC活检组织制备单细胞悬液执行10× Genomics单细胞RNA测序基于分支指数分层为高/低侵袭组进行细胞分群、亚群聚类与细胞通讯分析在TCGA-LIHC队列验证CD48表达与预后的相关性。二动物模型与体内实验构建C57BL/6原位HCC小鼠模型建立CD48全身敲除Cd48−/−小鼠分组给予抗CD48单克隆抗体、抗PD-1抗体及联合治疗监测肿瘤生长与转移。三细胞与分子生物学实验1巨噬细胞极化诱导2流式细胞术检测表型3免疫共沉淀、共聚焦荧光验证CD48与MMP14相互作用4核质分离与Western blot检测YAP核转位5qPCR检测免疫抑制/促炎基因表达6共培养体系评估CD8T细胞杀伤功能。四临床相关性验证多重免疫荧光染色检测HCC组织CD48、F4/80、CD8共定位分析CD48TAMs丰度与肿瘤分期、CD8T细胞浸润及PD-1抑制剂应答的关联。二、结果一单细胞测序鉴定CD48TAMs为HCC促肿瘤亚群18例HCC样本单细胞测序识别出6大细胞群TAMs与肿瘤细胞、T细胞通讯活跃TAMs分为4个亚群c3亚群特异富集于高侵袭肿瘤呈强免疫抑制表型。该亚群CD48显著高表达并与促肿瘤、免疫抑制基因正相关TCGA队列显示CD48TAMs特征评分高的患者总生存期显著缩短。CD48⁺TAMs 驱动 HCC 恶性进展及免疫抑制二CD48TAMs与PD-1抑制剂耐药密切相关抗PD-1治疗非应答者肿瘤组织中巨噬细胞CD48表达显著高于应答者且CD48TAMs亚群明显富集提示该亚群参与介导免疫耐药。三CD48缺失重编程TAMs并增强CD8T细胞功能Cd48−/−小鼠中巨噬细胞向M1型极化增强、M2型受抑CD8T细胞活化与杀伤功能提升肿瘤生长与转移显著受抑证实CD48是TAMs免疫抑制表型的关键调控分子。四CD48-MMP14顺式作用激活RAP1-YAP-STAT3信号轴机制研究显示CD48不依赖经典CD48-CD244轴而是与MMP14在细胞膜形成顺式复合物激活RAP1促进YAP核转位并与STAT3结合上调免疫抑制基因表达驱动TAMs促瘤表型。五抗CD48单药及联合抗PD-1协同抗肿瘤原位HCC模型中抗CD48单药显著抑制肿瘤与抗PD-1联用呈现强协同效应进一步降低肿瘤负荷、提升CD8T细胞浸润与功能提示联合治疗可克服免疫耐药。六临床样本验证CD48的预后价值多重免疫荧光证实CD48TAMs数量随HCC分期升高而增加与CD8T细胞浸润呈负相关支持CD48作为HCC预后标志物与治疗靶点的临床价值。三、讨论一研究意义该研究首次证实CD48是肝癌TAMs上的新型免疫检查点突破传统M1/M2分类局限明确CD48TAMs为驱动HCC进展与免疫耐药的关键亚群。其核心机制为CD48与MMP14顺式结合→激活RAP1-YAP-STAT3通路→TAMs向免疫抑制表型极化→抑制CD8T细胞功能→肿瘤进展与耐药。靶向CD48可重编程TAMs、解除免疫抑制单药有效且与抗PD-1协同为解决HCC低应答率提供新路径。该机制不局限于CD48-CD244经典轴拓展了GPI锚定蛋白的信号转导认知对其他实体瘤免疫治疗具有借鉴意义。二临床转化价值① CD48可作为HCC免疫治疗伴随诊断标志物筛选优势人群② 抗CD48抗体可开发为新型免疫治疗药物③ CD48阻断PD-1阻断有望成为HCC一线/二线联合方案提升长期生存。四、结论1CD48TAMs是HCC中促肿瘤、介导免疫治疗耐药的特异性巨噬细胞亚群。2CD48通过与MMP14顺式相互作用激活RAP1-YAP-STAT3信号轴调控TAMs免疫抑制表型。3CD48是TAMs上新型免疫检查点抗体阻断可重编程肿瘤微环境与抗PD-1协同抑制肝癌。4靶向CD48为克服HCC免疫耐药、开发联合免疫治疗提供全新靶点与策略。